旋毛虫成虫排泄分泌蛋白抗CLP诱导的小鼠脓毒症的观察

中国血吸虫病防治杂志 ›› 2016, Vol. 28 ›› Issue (3): 293-296,322.

旋毛虫成虫排泄分泌蛋白抗CLP诱导的小鼠脓毒症的观察

杨小迪1 ，贺文欣2 ，方强1 ，宋迪1 ，吴琦1 ，王小莉1 ，李楠3 ，齐琦2 ，万勇坤4 ，张慧1 ，周瑞4 ，陈兴智1 ，刘牧林4 ，李徽徽2* ，褚亮5*

1 蚌埠医学院病原生物学教研室，安徽省感染与免疫重点实验室（蚌埠 23303）； 2 蚌埠医学院组织学与胚胎学教研室； 3 蚌埠医学院病理学教研室； 4蚌埠医学院第一附属医院； 5 蚌埠医学院第二附属医院

出版日期:2016-06-13 发布日期:2016-06-14
通讯作者: 李徽徽，褚亮
作者简介:杨小迪，男，博士，副教授。研究方向：蠕虫与自身免疫学疾病的关联性研究
基金资助:
国家自然科学基金（81441120）；安徽高校科研创新平台团队项目（2016?40）；安徽省自然科学基金（1508085QH158）；安徽省高校优秀青年人才支持计划重点项目（gxyqZD2016159）；安徽省高等学校自然科学研究重点项目（KJ2016A708、 KJ2016A489、 KJ2016A869）

Effect of excretory/secretory protein of Trichinella spiralis adult worm on CLP-induced sepsis in mice

YANG Xiao-di 1 ，HE Wen-xin2 ，FANG Qiang1 ，SONG Di 1 ，WU Qi 1 ，WANG Xiao-li 1 ，LI Nan3 ，QI Qi 2 ，WAN Yong-kun4 ，ZHANG Hui 1 ， ZHOU Rui 4 ， CHEN Xing-zhi 1 ，LIU Mu- lin4 ， LI Hui-hui 2* ， CHU Liang5*

1 Department of Microbiology and Parasitology，Anhui Key Laboratory of Infection and Immunity，Bengbu Medical College， Bengbu 233030，China；2 Department of Histology and Embryology，Bengbu Medical College，China；3 Department of Patholo? gy，Bengbu Medical College，China；4 First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College，China；5 The Second Affiliated Hos? pital of Bengbu Medical College，China

Online:2016-06-13 Published:2016-06-14
Contact: LI Hui?hui，CHU Liang

摘要/Abstract

摘要： 目的目的探讨旋毛虫成虫排泄分泌蛋白（AES）对盲肠结扎穿孔术（CLP）诱导的小鼠脓毒症的抑制作用。方法方法将48只BALB/c小鼠随机分为3组，即假手术对照组（PBS + sham组， A组）、脓毒症组（PBS + CLP组， B组）、 AES蛋白治疗组（AES + CLP组， C组）。A组和B组于CLP术后经腹腔注射200 μl PBS， C组术后经腹腔注射含25 μg AES蛋白的等量 PBS。每组随机抽取8只，建模后观察各组小鼠的一般情况及96 h生存率；每组其余8只小鼠于建模后12 h取肝、肺、肾， HE染色观察病理改变；以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠血清中TNF?α、 IL?1β、 IL?6、 IL?10及TGF?β细胞因子水平的变化。结果结果 3组小鼠96 h生存率差异有统计学意义（χ2 = 21.16， P < 0.05）；与A组（100%）相比， B组小鼠生存率（0）降低（P < 0.05），且肺、肝及肾脏损伤明显加重；经AES治疗后， C组存活率（75%）明显增加（P < 0.05），小鼠肺脏、肝脏及肾脏病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中的促炎因子TNF?α （F = 27.11， P < 0.05）、 IL?1β （F = 18.75， P < 0.05）及IL?6 （F = 100.93， P < 0.05）水平差异均有统计学意义； B组小鼠的促炎因子水平均高于A组（P均< 0.05）；经AES治疗后， C组小鼠上述3种促炎因子水平较B组均显著下降（P均< 0.05）。3组小鼠血清中的调节性细胞因子IL?10 （F = 10.88， P < 0.05）及TGF?β （F = 11.37， P < 0.05）水平差异亦有统计学意义；经AES治疗后， C组小鼠IL?10及TGF?β分泌水平较B组亦明显增加（P < 0.05）。结论结论旋毛虫AES对CLP诱导的BALB/c小鼠脓毒症有显著的缓解作用。

关键词: 旋毛虫, 盲肠结扎穿孔术, 排泄分泌蛋白, 脓毒症, 小鼠, 促炎因子, 抑炎因子

Abstract: Objective Objective To observe the effect of excretory/secretory products from Trichinella spiralis adult worms（AES）on cecal ligation and puncture（CLP） ?induced sepsis in mice. Methods Methods Forty? ?eight BALB/c mice were randomly divided into 3 groups：a sham operation group（PBS + sham group，Group A），a CLP?induced sepsis group（PBS+ CLP group，Group B）and an AES treatment group（AES+ CLP group，Group C） . The mice of each group were intraperitoneally injected with 25 μg of AES or PBS only as a control in a total volume of 200 μl. Eight mice from each group were selected randomly for survival analy? sis of 96 hours. The other 8 mice in each group were observed for pathological changes in the lung，liver and kidney tissues by HE staining 12 h after CLP，and then determined for the detection of cytokines including TNF?α，IL?1β，IL?6，IL?10 and TGF?β in the sera by ELISA. Results Results The difference among the survival rates of mice in the 3 groups was statistically significant （χ2 = 21.16，P < 0.05） . Compared to Group A（100%），the survival rate of mice in Group B（0）decreased significantly（P < 0.05），and also the pathological damage degrees in the lung，liver and kidney tissues of the mice in Group B increased signifi? cantly after CLP. Compared with the mice in group B，the survival rate of those in Group C（70%）increased significantly（P < 0.05），and the pathological damage degrees in the lung，liver and kidney tissues of the mice in Group C decreased significantly after the treatment with AES. The differences among the levels of pro?inflammatory cytokines TNF?α（F = 27.11，P < 0.05），IL? 1β（F = 18.75，P < 0.05）and IL?6（F = 100.93，P < 0.05）in the sera of the mice in the three groups were statistically signifi? cant. Compared with the mice in Group A，the levels of the 3 cytokines of those in Group B increased significantly（all P < 0.05） . However，after the treatment with AES，the levels of the pro?inflammatory cytokines of those in Group C decreased signifi? cantly（all P < 0.05） . The differences among the levels of immunoregulatory cytokines IL?10（F = 10.88，P < 0.05）and TGF?β （F = 11.37，P < 0.05）in the sera of the mice in the three groups were also statistically significant. Compared with the mice in Group B，the levels of IL?10 and TGF?β of those in Group C were higher after treatment with AES（both P < 0.05） . Conclu Conclu? ? sion sion T. spiralis AES has a therapeutic potential for alleviating sepsis induced by CLP in mice.

Key words: Trichinella spiralis, Cecal ligation and puncture（CLP）operation, Excretory/secretory products, Sepsis, Pro? inflammatory cytokine, Anti?inflammatory cytokine

杨小迪，贺文欣，方强，宋迪，吴琦，王小莉，李楠，齐琦，万勇坤，张慧，周瑞，陈兴智，刘牧林，李徽徽，褚亮. 旋毛虫成虫排泄分泌蛋白抗CLP诱导的小鼠脓毒症的观察[J]. 中国血吸虫病防治杂志, 2016, 28(3): 293-296,322.

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