中国血吸虫病防治杂志 ›› 2013, Vol. 25 ›› Issue (4): 375-.
唐小牛|季丰|姜玉新|湛孝东|李朝品*
TANG Xiao-niu| JI Feng| JIANG Yu-xin| ZHAN Xiao-dong| LI Chao-pin*
摘要:
目的 目的 探讨重组日本血吸虫P14蛋白 (SjP14) 对血吸虫感染小鼠的免疫保护效果。方法 方法 构建SjP14原核表达质粒pET28a (+) ? SjP14, 异丙基?β?D?硫代半乳糖苷诱导表达重组蛋白rSjP14, 纯化蛋白后, 进行十二烷基磺酸钠?聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS?PAGE) 和Western blotting鉴定。将6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为SjP14重组蛋白实验组 (A组)、 佐剂对照组 (B组)、 生理盐水对照组 (C组), 每组10只。每鼠每次注射抗原100 μg, 免疫3次, 每次间隔2周, 末次免疫后2周, 血吸虫尾蚴攻击感染。分别于免疫前、 免疫后6周和感染后6周经眶静脉采血, 分离血清, 采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测血清总IgG、 IL?4和IFN?γ。血吸虫尾蚴攻击感染后6周, 剖杀小鼠, 计算各组的减虫率和肝脏减卵率。结果 结果 SjP14原核表达产物相对分子质量 (Mr) 约为38 000; rSjP14能被SjP14多克隆抗体识别。血吸虫尾蚴攻击感染后6周, A组特异性IgG抗体水平升高, 为 (25.52±1.91)μg/ml, 与C组 [(18.65±3.16)μg/ml] 和B组 [(22.44±2.83)μg/ml] 相比差异均有统计学意义 (P 均<0.05)。IFN?γ浓度升高, 为 (171.30±70.12)ng/L, 与C组 [(136.89±37.62)ng/L] 和B组 [(153.64±43.44)ng/L] 相比差异均有统计学意义 (P均<0.05)。A组免疫后6周IL?4先略有升高, 感染后6周下降, 为 (112.05±15.02) ng/L, 与C组 [(102.82± 27.46)ng/L] 相比差异有统计学意义 (P<0.05)。A组小鼠减虫率和减卵率分别为29.2%和41.3%, 与B、 C组相比差异均有统计学意义 (P均<0.05)。结论 结论 SjP14蛋白疫苗具有一定的抗血吸虫感染免疫保护作用。
中图分类号: