中国血吸虫病防治杂志 ›› 2017, Vol. 29 ›› Issue (3): 334-337.
许树俊|王康|张敏红|陈文捷|管国宇|刘曼曼|徐蕾|孙恩涛*
出版日期:
2017-06-20
发布日期:
2017-06-20
通讯作者:
孙恩涛
作者简介:
许树俊|男|本科生。研究方向:分子病原生物学
基金资助:
XU Shu-jun| WANG Kang| ZHANG Min-hong| CHEN Wen-jie| GUAN Guo-yu| LIU Man-man| XU Lei| SUN En-tao*
Online:
2017-06-20
Published:
2017-06-20
Contact:
SUN En?tao
摘要: 目的 比较改良SDS法、TRIzol法和CTAB法对湖北钉螺RNA的提取效果,以期获得一种经济、高效,适于湖北钉螺大样本RNA的制备方法。方法 采用改良SDS法、TRIzol法和CTAB法分别提取湖北钉螺RNA,利用核酸蛋白分析仪测定RNA浓度和纯度,通过浓度计算产率,纯度以A260/A280、A260/A230表示;以1%琼脂糖凝胶电泳进一步检验RNA完整性;以β?acting为目的基因进行RT?PCR,验证提取的RNA能否满足RT?PCR的实验要求。结果 经方差分析,3种方法的产率差异具有统计学意义(F = 16 895.85,P < 0.01);经LSD检验,改良SDS法产率较高,其次为TRIzol法,CTAB法产率较低。CTAB法提取的RNA纯度较高,A260/A280、A260/A230分别在1.8~2.0和2.0~2.2之间,其余两种方法的A260/A230均低于2.0。改良SDS法提取的RNA完整性较好,电泳结果显示28S、18S和5S条带完整清晰,条带之间无明显弥散现象;而TRIzol法未见28S条带,CTAB法仅见18S条带。3种方法提取的RNA经RT?PCR均能扩增出阳性条带。相比另外两种方法,改良SDS法成本低、耗时少。结论 改良SDS法是一种经济、高效,适于湖北钉螺大样本RNA的制备方法。
中图分类号:
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