中国血吸虫病防治杂志 ›› 2023, Vol. 35 ›› Issue (5): 458-463.
陈剑峰1,王志奇1,黄文明1,王进1,陈莉娟1,孙运乐1,赵兰梅2,赵扬3,钱印4,段峻伟5,张强6*
CHEN Jianfeng1, WANG Zhiqi1, HUANG Wenming1, WANG Jin1, CHEN Lijuan1, SUN Yunle1, ZHAO Lanmei2, ZHAO Yang3, QIAN Yin4, DUAN Junwei5, ZHANG Qiang6*
摘要: 目的 评价重组酶介导的核酸等温扩增技术(recombinase⁃aided amplification,RAA)用于淡水鱼肉样本中华支睾吸虫囊蚴检测效果,为后续该方法标准化及现场应用提供科学依据。方法 2022年6—9月在江苏省泰州市姜堰区、兴化市、泰兴市华支睾吸虫感染阳性人群所在行政村河道内采集野生淡水鱼样本。取6份不含华支睾吸虫囊蚴的鱼肉组织(每份5 g),分别加入0、1、2、4、8、16个华支睾吸虫嚢蚴,提取鱼肉组织基因组DNA后采用荧光RAA法进行检测,评价该方法检测灵敏度;分别以华支睾吸虫、东方次睾吸虫、钩棘单睾吸虫、台湾棘带吸虫嚢蚴基因组DNA为模板,采用荧光RAA法检测,评价其交叉反应;分别采用荧光RAA法和压片法检测现场采集的淡水鱼样本,比较两种方法检测华支睾吸虫效果。结果 含1、2、4、8、16个华支睾吸虫囊蚴的鱼肉组织样本均出现阳性扩增,荧光RAA法可在20 min内对5 g鱼肉组织中含1个华支睾吸虫囊蚴的样本实现阳性扩增;以东方次睾吸虫、钩棘单睾吸虫、台湾棘带吸虫嚢蚴基因组DNA为模板进行RAA检测,结果均为阴性。对采集的1 735条淡水鱼分别采用荧光RAA法和压片法进行检测,两种方法华支睾吸虫检出率分别为5.36%(93/1 735)和2.88%(50/1 735),差异有统计学意义([χ2] = 478.150,P < 0.001)。经压片法([χ2] = 11.20,P < 0.05)和荧光RAA法([χ2] = 20.26,P < 0.001)检测,发现不同鱼种华支睾吸虫检出率差异均有统计学意义,麦穗鱼华支睾吸虫检出率高于其他鱼种(P 均< 0.05)。结论 荧光RAA法检测淡水鱼肉样本中华支睾吸虫感染的灵敏度较高,与东方次睾吸虫、钩棘单睾吸虫、台湾棘带吸虫无交叉反应,检测现场采集淡水鱼华支睾吸虫感染的准确性高于压片法。
中图分类号: