中国血吸虫病防治杂志 ›› 2017, Vol. 29 ›› Issue (2): 174-181.
高倩|李艳伟|黄文铃|赵琴平|董惠芬*
GAO Qian| LI Yan-wei| HUANG Wen-ling| ZHAO Qin-ping| DONG Hui-fen*
摘要： 目的 克隆、鉴定湖北钉螺（Oncomelania hupensis）髓样分化因子88（MyD88）基因，并通过观察感染日本血吸虫前后钉螺各组织中MyD88 mRNA表达水平的变化，探讨其在抗血吸虫感染固有免疫中的地位。方法 通过cDNA末端快速扩增技术（Rapid amplification of cDNA ends，RACE）获取湖北钉螺MyD88全长cDNA序列，预测其蛋白结构域，并进行多序列比对及保守区域分析，构建系统进化树。使用实时荧光定量PCR（Real?time quantitative PCR，RT?qPCR）技术检测MyD88基因在血吸虫感染前后钉螺各组织中的表达变化。结果 湖北钉螺MyD88全长cDNA开放阅读框（Open reading frame，ORF）1 406 bp，编码468个氨基酸，蛋白N端和C端分别存在死亡结构域和TIR（Toll/interlrukin?1 receptor，TIR）结构域。与其他软体类MyD88氨基酸序列比对，相似性为38%~52%；系统进化树提示钉螺MyD88和光滑双脐螺MyD88起源于共同的祖先基因。qPCR结果显示，检测的所有组织中均有MyD88 mRNA的表达，其中血淋巴细胞中表达最为丰富。感染日本血吸虫后，除钉螺头足外，MyD88 mRNA在肝脏、生殖腺、血淋巴细胞等组织中均有上调表达，以血淋巴细胞中上调表达最显著。结论 湖北钉螺存在依赖MyD88的TLRs（Toll?like receptors，TLRs）信号通路，MyD88分子可能在钉螺对抗日本血吸虫感染的固有免疫中发挥重要作用。
中图分类号:
苏公网安备32021102001651 苏ICP备11056399号-2
