中国血吸虫病防治杂志 ›› 2016, Vol. 28 ›› Issue (5): 541-.
朱慧慧|高春花*|汪俊云|杨玥涛|石锋
ZHU Hui-hui|GAO Chun-hua*|WANG Jun-yun|YANG Yue-tao|SHI Feng
摘要: 目的克隆、表达细粒棘球绦虫基底膜特异性硫酸乙酰肝素聚糖核心蛋白(H3),并评价其检测囊型包虫病的 效果。方法将从细粒棘球绦虫原头节cDNA文库中免疫筛选的H3基因,克隆入pGEX?4T表达载体,将重组质粒转化 大肠杆菌BL21细胞,用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,用亲和层析法纯化重组蛋白,用ELISA方法检测囊型 包虫病患者血清、其他寄生虫病患者血清及健康人血清,评价其检测效能,并与本课题组制备的细粒棘球蚴包囊液粗抗 原(Hydatid cyst fluid,HCF)和重组AgB8/2进行比较。结果成功构建细粒棘球蚴pGEX?4T?H3重组质粒,并在原核细胞 中成功表达。重组H3抗原、纯化HCF和rAgB8/2检测囊型包虫病患者血清的敏感度分别为84.0%(68/81)、90.1%(73/ 81)、77.8%(63/81),3者差异无统计学意义( χ2 = 4.58,P > 0.05)。重组H3抗原与泡型包虫病患者、囊虫病患者及血吸虫 病患者血清分别存在63.3%(19/30)、16.7%(5/30)和5.0%(1/20)的交叉反应,与50份健康者血清无交叉反应;H3检测总 特异度为80.8%(105/130),H3、纯化HCF[71.5%(93/130)]和rAgB8/2[82.3%(107/130)]特异度间差异无统计学意义 (χ2 = 5.71,P > 0.05)。结论重组H3抗原在囊型包虫病诊断上具有潜在的应用价值。
中图分类号: