中国血吸虫病防治杂志 ›› 2014, Vol. 26 ›› Issue (1): 42-.
蔡玉春|陈韶红|田利光|储言红|卢艳|陈木新|艾琳|周洋|陈家旭*
CAI Yu-chun| CHEN Shao-hong| TIAN Li-guang| CHU Yan-hong| LU Yan|CHEN Mu-xin| AI Lin|ZHOU Yang| CHEN Jia-xu*
摘要： 目的 目的 建立基于A1E3及B1C4单克隆抗体检测日本血吸虫循环抗原的夹心酶联免疫吸附试验 （ELISA）， 并对其 应用情况进行初步评价。 方法 方法 采用十二烷基磺酸钠?聚丙烯酰胺凝胶电泳 （SDS?PAGE） 和免疫印迹试验 （Western blot? ting） 对A1E3及B1C4单克隆抗体进行特性分析， 用ELISA 法测定B1C4、 A1E3单克隆抗体效价。采用棋盘格滴定法确定双 单抗夹心ELISA法检测循环抗原的最佳工作浓度。在最佳条件下， 分别检测20份急性血吸虫病病人血清、 46份慢性血吸 虫病病人血清及20份正常人血清， 评价其检测敏感性和特异性。用建立的双单抗夹心ELISA法和市售检测血吸虫循环抗 原的ELISA试剂盒检测湖北省江陵县IHA阳性血吸虫病病人血清72份， 以评估双单抗夹心ELISA法的检测效能。 结果 结果 经SDS?PAGE和Western blotting分析， 纯化后的A1E3及B1C4在相对分子质量 （Mr ） 88 000和52 000处各有一条清晰重链， 在Mr 20 000处有一条相同的轻链， 且A1E3及B1C4可与可溶性虫卵抗原 （SEA） 及急性血吸虫病病人血清发生特异性反 应。B1C4单抗效价可达1∶105 ， A1E3单抗效价可达1∶30 000。用B1C4、 A1E3双单抗夹心ELISA法检测急、 慢性血吸虫病 病人血清阳性率分别为100%和86.9%， 检测20份正常人血清特异性为100%。双单抗夹心ELISA法及市售ELISA试剂盒 检测日本血吸虫循环抗原阳性率分别为45.8%及43.1%。 结论 结论 成功建立了基于A1E3及B1C4双单抗夹心ELISA法， 该 法检测日本血吸虫循环抗原具有较高的敏感性及特异性。
中图分类号:
苏公网安备32021102001651 苏ICP备11056399号-2
