中国血吸虫病防治杂志 ›› 2012, Vol. 24 ›› Issue (4): 435-439.
徐岁1|周华云1|唐建霞1|李菊林1|朱国鼎1|苏云普2|黄光全3|曹俊1|高琪1*
XU Sui 1|ZHOU Hua-yun1|TANG Jian-xia1|LI Ju-lin1|ZHU Guo-ding1|SU Yun-pu2|HUANG Guang-quan3|CAO Jun1|GAO Qi1*
摘要:
目的 建立一种新的赫坎按蚊复合体近缘种按蚊基因鉴别技术, 应用于现场按蚊样本的鉴别。方法 用分子生物学软件Vector NTI 9.0, 对赫坎按蚊复合体的嗜人按蚊、 雷氏按蚊、 中华按蚊、 八代按蚊4个近缘种按蚊rDNA基因的ITS2 区段序列进行限制性内切酶酶切位点预测分析, 选择特异性内切酶, 建立一种能同时鉴别4种近缘种按蚊的聚合酶链反应 ?限制性片段长度多态 (PCR?RFLP) 单酶切法鉴别技术, 并对现场捕获的452只按蚊样本进行基因鉴别。结果 软件预测赫坎按蚊复合体近缘种4种按蚊的rDNA基因的ITS2区段可被限制性内切酶Dde I切成大小易于区分的不同片段, PCR? RFLP单酶切实验结果和软件预测结果完全吻合。4个疟疾流行区捕获的452只按蚊样本经PCR?RFLP Dde I 单酶切法鉴定有20只嗜人按蚊、 6只雷氏按蚊、 391只中华按蚊、 35只八代按蚊, 与形态学鉴别结果符合率为93.4%, 与PCR?RFLP双酶切法结果符合率为100%。 结论 新建立的PCR?RFLP Dde I 单酶切法基因鉴别技术可准确鉴别赫坎按蚊复合体, 比传统的形态学鉴别更为简便、 可靠, 适合用于复合媒介地区的媒介监测。
中图分类号: