中国血吸虫病防治杂志 ›› 2007, Vol. 19 ›› Issue (3): 161-164.
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余传信|殷旭仁|李健|许永良|徐明|高琪|梁幼生
Yu Chuan-xin, Yin Xu-ren, Li Jian, Xu Yong-liang, Xu Ming, Gao Qi, Liang You-sheng
摘要:
目的表达日本血吸虫胞浆内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),并研究其免疫原性。方法采用反转录PCR方法从血吸虫成虫mRNA中扩增出SOD基因序列,再亚克隆到表达载体pGEX-4T-3中构建重组表达质粒并转化到E.coli BL21(DE3)中。用IPTG对含有重组质粒的转化子细菌进行诱导表达重组的GST-SOD蛋白。用重组GST-SOD蛋白免疫小鼠制备免疫血清,并用免疫印迹试验观察重组GST-SOD融合蛋白的免疫原性。结果 日本血吸虫胞浆内SOD基因被成功地扩增,并构建成功含此基因的重组表达质粒Sj SOD-pGEX-4T-3。含重组质粒的E. coli在IPTG的诱导下能表达一大小约43 kDa的GST-SOD重组蛋白。用此蛋白免疫小鼠产生的特异性抗体水平最高能达1: 12 800,该萤组蛋白可以被血吸虫重感染兔血清所识别。结论 日本血吸虫中国大陆株胞浆内SOD表达成功,并具有良好的免疫原性。
中图分类号: