中国血吸虫病防治杂志 ›› 2016, Vol. 28 ›› Issue (1): 34-38.DOI: 10.16250/j.32.1374.2015168
苏胖胖，孟令文，李江艳，陶志勇，陈勇，乔继琛，武肖肖，金赟，王好鹏，方强，王雪梅，夏惠*
SU Pang-pang， MENG Ling-wen， LI Jiang-yan， TAO Zhi-yong， CHEN Yong， QIAO Ji-chen， WU Xiao-xiao， JIN-Yun， WANG Hao-peng， FANG Qiang， WANG Xue-mei， XIA Hui*
摘要： 目的 目的 克隆恶性疟原虫配子体期特异性基因 （Plasmodium falciparum gametocyte development 1 gene，Pfgdv1）， 体外表达和鉴定重组Pfgdv1蛋白。方法 方法 通过PCR法从恶性疟原虫感染病人血液DNA样本中扩增Pfgdv1基因， 插入到 原核表达载体pET28a （+）， 构建pET28a?Pfgdv1重组表达质粒， 转化至大肠埃希菌 （E. coli） BL21 （DE3+）， 通过异丙基?β?D? 硫代吡喃半乳糖苷诱导表达重组蛋白， 经Ni + ?亲和层析柱纯化重组蛋白， 纯化产物经十二烷基磺酸钠?聚丙烯酰胺凝胶电 泳 （SDS?PAGE） 和Western blotting鉴定。结果 结果 PCR扩增的Pfgdv1基因长度约为1.65 kb， 重组pET28a?Pfgdv1质粒构建 成功， 插入方向正确无框移， 转化至E. coli BL21 （DE3+） 所表达的重组蛋白分子量约为67 kDa， 且能被抗His标签单克隆 抗体识别。结论 结论 成功克隆了Pfgdv1基因， 表达并纯化了重组Pfgdv1蛋白， 为进一步研究恶性疟原虫配子体期传播阻断 疫苗奠定了基础。
中图分类号:
苏公网安备32021102001651 苏ICP备11056399号-2
