中国血吸虫病防治杂志 ›› 2021, Vol. 33 ›› Issue (1): 54-.
高海军1, 2, 3, 4△,庞华胜1△,孙旭冬2,张颋1, 3*,景涛2*,王晓玲3,莫筱瑾3,胡薇3
GAO Hai-Jun1, 2, 3, 4△, PANG Hua-Sheng1△, SUN Xu-Dong2, ZHANG Ting1, 3*, JING Tao2*, WANG Xiao-Ling3, MO Xiao-Jin3, HU Wei3
摘要: 目的 评价泡球蚴持续感染对小鼠肝脏纤维化的影响,为研究泡型棘球蚴病肝纤维化进展及其治疗方法提供参考。方法 以泡球蚴感染长爪沙鼠血清(25、50、100 μL)和泡球蚴及其生发层细胞、原头节分别对肝星状HSC?T6和LX?2细胞进行体外刺激48 h,采用CCK?8法检测细胞增殖,应用酶联免疫吸附试验(enzyme?linked immunosorbent assay,ELISA)检测HSC?T6细胞培养上清中Ⅰ型胶原蛋白(collagen 1, Col1)和α?平滑肌动蛋白(α?smooth muscle actin,α?SMA)表达量。收集泡球蚴感染1、2、4、6、8个月小鼠血清和肝脏,分别采用ELISA法检测血清中Col1和α?SMA含量,采用天狼星红染色法动态观察肝脏胶原纤维沉积情况。结果 泡球蚴感染沙鼠血清体外可诱导HSC?T6和LX?2细胞增殖,不同血清剂量组细胞增殖率差异均有统计学意义(FHSC?T6 = 126.50、FLX?2 = 201.50,P 均< 0.05);其中100 μL血清对HSC?T6和LX?2细胞促增殖率最高,HSC?T6和LX?2细胞增殖率分别为(573.36 ± 206.34)%和(940.38 ± 61.65)%。泡球蚴感染沙鼠血清体外刺激后,HSC?T6细胞培养上清中Col1和α?SMA蛋白含量均上升;且以100 μL血清刺激后Col1和α?SMA含量最高,分别为(20.99 ± 2.01) ng/mL和(305.52 ± 16.67) pg/mL。泡球蚴及其生发层细胞、原头节均可体外诱导HSC?T6和LX?2细胞增殖,增殖率分别为(142.65 ± 9.17)%和(189.99 ± 7.75)%、(118.55 ± 8.96)%和(122.54 ± 0.21)%、(156.34 ± 17.45)%和(160.59 ± 31.41)%,不同刺激组细胞增殖率差异均有统计学意义(FHSC?T6 = 11.24、FLX?2 = 47.72,P均 < 0.05);泡球蚴及其生发层细胞、原头节刺激后,HSC?T6细胞培养上清中Col1和α?SMA含量均增高;且以泡球蚴作用最为明显,Col1和α?SMA含量分别为(4.43 ± 2.23) ng/mL和(285.20 ± 90.67) pg/mL。泡球蚴感染后1~8个月,小鼠肝脏中胶原纤维沉积持续增加;小鼠血清中Col1水平在感染后6个月达最高,为(280.26 ± 23.04) ng/mL;α?SMA水平在感染后8个月达最高,为(33.68 ± 4.45) ng/mL。结论 泡球蚴持续感染可促进肝星状细胞体外增殖及小鼠血清中Col1和α?SMA蛋白含量升高,引起小鼠肝脏中胶原纤维沉积增多。泡球蚴感染阶段是引起泡型棘球蚴病肝纤维化的关键期。
中图分类号: